正確的處理樣本是確保ELISA檢測(cè)的正確性和準(zhǔn)確性的一步，下面簡(jiǎn)單介紹一下不同類型的樣本的處理辦法。
血清

血清是常用于ELISA檢測(cè)的一類樣本，處理也比較簡(jiǎn)單。

用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管收集血液標(biāo)本，將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃一個(gè)晚上，使血清分出。（將試管或離心管歪斜放置，使液面橫截面增大，能使血清更大程度的分出。）4℃ 1000×g離心20分鐘，細(xì)心搜集上清。主張將血清分裝多份，-20℃或-80℃保存，防止重復(fù)凍融。采血過(guò)程中應(yīng)防止溶血，由于紅細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)開(kāi)釋具有過(guò)氧化酶活性的物質(zhì)，在以HRP為符號(hào)的
人鼠elisa試劑盒檢測(cè)中會(huì)有非特異性的顯色，而導(dǎo)致檢測(cè)的不準(zhǔn)確性。一起也應(yīng)防止細(xì)菌污染，由于菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP然后導(dǎo)致檢測(cè)的假陽(yáng)性。
安排勻漿液

1）將安排樣本用PBS (0.01錨點(diǎn)錨點(diǎn)M, PH 7.4) 沖刷，洗去安排外表殘留的血液或雜質(zhì)。

2）將安排塊稱重，記錄后剪碎，碎塊應(yīng)盡量小，便于勻漿得更充沛

3）將安排按必定的份額參加預(yù)冷的PBS（臨用前參加蛋白酶抑制劑）勻漿，勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。

4）吸取勻漿液到離心管，4℃ 5000×g 離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，防止重復(fù)凍融。
尿液、唾液等其他液體生物樣本

1000×g離心20min，取上清即可檢測(cè)?？偟膩?lái)說(shuō)，由于ELISA只能檢測(cè)可溶性蛋白的含量，所以應(yīng)確保一切樣本均為澄清的液體，沉積或懸浮物都應(yīng)離心去除。為了確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性，保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)；4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

細(xì)胞裂解液

1）吸去培育板內(nèi)的培育基，用胰酶消化細(xì)胞，加適量培育基將細(xì)胞從培育板上吹下來(lái)。懸浮細(xì)胞可省略。

2）搜集細(xì)胞懸液，1000×g離心10min，棄去培育基，用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。

3）參加適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液（臨用前參加蛋白酶抑制劑）重懸細(xì)胞。一般6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需求150~250μL PBS重懸。

4）將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，重復(fù)凍融幾回，使細(xì)胞充沛裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎，以到達(dá)裂解的意圖。

5）4℃ 10000×g 離心10min，除掉細(xì)胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，防止重復(fù)凍融。