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晶抗為您創(chuàng)造的血清學(xué)之分離介紹
更新時(shí)間:2019-08-02   點(diǎn)擊次數(shù):921次

今天上海晶抗要為您介紹的是血清分離方法。

·血清的分離

  1.只有經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)的人員才能進(jìn)行這項(xiàng)工作。

  2.操作時(shí)應(yīng)戴手套以及眼睛和黏膜的保護(hù)裝置。

  3.規(guī)范的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)可以避免或盡量減少?lài)姙R和氣溶膠的產(chǎn)生。血液和血清應(yīng)當(dāng)小心吸取,而不能傾倒。嚴(yán)禁用口吸液。

  4.移液管使用后應(yīng)*浸入適當(dāng)?shù)南疽褐?。移液管?yīng)在消毒液中浸泡適當(dāng)?shù)臅r(shí)間,然后再丟棄或滅菌清洗后重復(fù)使用。

  5.帶有血凝塊等的廢棄標(biāo)本管,在加蓋后應(yīng)當(dāng)放在適當(dāng)?shù)姆缆┤萜鲀?nèi)高壓滅菌和/或焚燒。

  6.應(yīng)備有適當(dāng)?shù)南緞﹣?lái)清洗噴濺和溢出標(biāo)本
                     
    在細(xì)菌的血清鑒定中,zui常使用的方法是凝集反應(yīng),其基本原理是細(xì)菌為顆粒性抗原,當(dāng)與相應(yīng)的抗體混合時(shí),在一定濃度的電解質(zhì)條件下,可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。
 
    玻片法凝集實(shí)驗(yàn)是用診斷血清在玻片上與待測(cè)細(xì)菌相混合,在電解質(zhì)存在下,若出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集小塊即為陽(yáng)性,表示該菌為所用抗體的相應(yīng)細(xì)菌。此法是一種定性實(shí)驗(yàn),方法簡(jiǎn)便快速,特異性強(qiáng)??捎糜阼b定菌種及菌型。用于鑒定細(xì)菌的診斷血清有以下幾種: 

    1.多價(jià)診斷血清:即混合診斷血清。該血清含有兩種(或型)以上細(xì)菌的相應(yīng)抗體。一般用于細(xì)菌定群或初步分型。
 
    2.單價(jià)診斷血清僅含一種(或型)細(xì)菌的相應(yīng)抗體。可用于細(xì)菌的定種(或型)。
 
    3.因子診斷血清細(xì)菌含有多種抗原成分,而且不同菌群細(xì)菌之間可有共同的抗原成分。因此,通過(guò)凝集吸收實(shí)驗(yàn),將抗血清中的共同抗體除掉,僅含一種特異性抗體的診斷血清稱(chēng)為因子血清??捎糜诩?xì)菌分型。 

[所需材料]  
    1.菌種豬霍亂沙門(mén)菌。 

    2.診斷血清沙門(mén)菌A-E多價(jià)血清,定群的6個(gè)O群因子血清,定型的H因子血清。 

    3.其他:0.9%氯化鈉溶液、載玻片等。 

[操作方法]
    1.取一潔凈載玻片,用記號(hào)筆劃兩個(gè)1—1.5cm的圓圈。 

    2.取1:5或1:10診斷血清一接種環(huán)置于玻片左側(cè)圈內(nèi),在右側(cè)圈內(nèi)放一接種環(huán)0.9%氯化鈉作為對(duì)照。如天氣炎熱,環(huán)境溫度高,則應(yīng)適當(dāng)多取血清及0.9%氯化鈉,以防試劑短時(shí)間內(nèi)干涸,影響結(jié)果的觀察。 

    3.用接種環(huán)取待鑒定的新鮮細(xì)菌少許,分別研磨乳化于診斷血清及0.9%氯化鈉內(nèi)使之均勻混合。旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)玻片數(shù)次,1—3分鐘后觀察結(jié)果。 

    按上述操作方法,依次分別做A-E多價(jià)血清定屬,特異性O(shè)因子血清定群,H因子血清定型(或種)。 

[結(jié)果] 

 陰性:對(duì)照側(cè)及實(shí)驗(yàn)側(cè)均勻混濁不出現(xiàn)凝集。 

 陽(yáng)性:鹽水對(duì)照側(cè)呈現(xiàn)均勻混濁,實(shí)驗(yàn)側(cè)明顯凝集。 

 自凝:對(duì)照側(cè)及實(shí)驗(yàn)側(cè)均出現(xiàn)凝集。 

    標(biāo)本的檢測(cè),常常還需要加作一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照。觀察結(jié)果時(shí),先觀察陰性對(duì)照及陽(yáng)性對(duì)照,兩個(gè)對(duì)照結(jié)果均符合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí),再觀察實(shí)驗(yàn)孔。
   
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