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上海晶抗生物細(xì)胞株培養(yǎng)中如何消除組織培養(yǎng)的污染
更新時間:2022-09-26   點擊次數(shù):1148次

我司分析細(xì)胞株培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,細(xì)胞培養(yǎng)都是一個的過程。

當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細(xì)胞系有毒性,因而,做劑量反應(yīng)實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。

下面是我司推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟: 

1. 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。 

2. 分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,推薦下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。 

3. 每天觀測細(xì)胞毒性指標(biāo),如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。 

4. 確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度2~3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2~3代。

5. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。

6. 重復(fù)步驟4。

7. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4~6代,確定污染是否以已被消除。 


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