晶抗生物教您收到細胞后正確的處理方法如下:
1.收到細胞需要鏡檢:調(diào)查細胞形狀是否正常,關(guān)于貼壁細胞則要留意看貼壁狀況是否很好,調(diào)查細胞密度,有疑議及時咨供給細胞的技術(shù)人員。因為運送的時刻或許溫度的變化,許多貼壁細胞在盛滿培育基的瓶子里成長的狀況和平時會有點不一樣,主要是貼壁結(jié)實問題。比方293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培育基瓶子里面,會發(fā)生大片的掉落,細胞集合在一起,可是細胞成長仍是正常的,經(jīng)過離心搜集,加以消化,從頭打散,又能夠正常的貼壁成長。
2.當經(jīng)過上一步的調(diào)查,細胞開始沒有任何問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密到達80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培育基,僅保存5到10mL培育所需的慣例培育基;或替換新鮮的培育基,置于培育箱中,隨后每天調(diào)查。細胞在低于正常成長溫度狀況下,會調(diào)整為停止期,或許慢速成長期,有必要康復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才干從頭調(diào)整到挨近對數(shù)成長期的狀況,在對數(shù)成長期進行細胞的傳代會大大添加傳代的成功率,和細胞的存活率。
3.如果經(jīng)步調(diào)查發(fā)現(xiàn)細胞密度超越90%,并且細胞狀況很好時,則復(fù)溫后2個小時需求當即傳代。傳代的份額應(yīng)根據(jù)不同的細胞而定。關(guān)于成長比較快,狀況安穩(wěn),不易受外界影響的細胞能夠一次多傳幾瓶;關(guān)于成長較慢,細胞比較薄,狀況簡單波動的細胞類型,一次少傳些,確保每瓶細胞密度大些,便于安穩(wěn)成長。至于一些比較生疏的細胞,次處理也能夠按照第二種狀況。
當大家收到細胞后可以按照上面的方法進行處理,這樣就很好的避免細胞出現(xiàn)問題。
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