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ELISA試劑盒實驗詳解
更新時間:2015-01-21   點擊次數(shù):1453次



顯微鏡的物鏡一般有低倍鏡、高倍鏡及油鏡。病原生物學(xué)實驗中zui常用者為油鏡。
1.油鏡的原理 使用油鏡時需在玻片上滴加香柏油。由于從標(biāo)本玻片上透過的光線,因介質(zhì)密度不同,部分光線發(fā)生折射散失,使射入物鏡光線減少(高倍鏡孔徑較大,影響不顯著),因油鏡的孔徑較小,進(jìn)入的光線則不夠,致使物象顯現(xiàn)不清。當(dāng)在油鏡與標(biāo)本片之間加香柏油后,香柏油折射率(n=1.515)和玻璃的折射率(n=1.52),因此可增加進(jìn)入透鏡的光線,使視野亮度加強(qiáng)。

2. 在油鏡頭上常有下列幾種標(biāo)記:①放大倍數(shù)是90×或100/;若鏡筒的長度不變,顯微鏡的放大倍數(shù)=目鏡倍數(shù)乘以物鏡的倍數(shù)。②鏡頭下緣有一白色線圈或黑色線圈;③刻有
“油"或外文“HI"、“Oel"、“Oil"等字樣。④油鏡頭的長度大于低倍鏡和高倍鏡。

3. 使用方法
① 對光 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,將低倍鏡鏡頭(4 倍、10 倍)轉(zhuǎn)至載物臺中央透光孔位置,打開透光光闌,對光,直至目鏡中出現(xiàn)光線zui明亮、zui均勻的視場為止。顯微鏡的光源可分為內(nèi)置光源和外置照明。內(nèi)置光源:接通電源,按下底座的開關(guān),電源打開即可。外置光源:將光圈放到zui大位置,在用眼睛觀察目鏡的同時,轉(zhuǎn)動反光鏡使其朝向光源(自然光或燈光),使視野中的光線zui明、均勻。如靠近光源,可用平面反光鏡,如距光源較遠(yuǎn),可用凹面反光鏡。根據(jù)所觀察的標(biāo)本,升降集光器和縮放光圈,以獲*光度。一般染色標(biāo)本用油鏡檢查時,光度宜強(qiáng),可將光圈開足,集光器上升至與載物臺相平;檢查未染色標(biāo)本用低倍鏡或高
倍鏡觀察時,應(yīng)適當(dāng)縮小光圈,下降集光器,使光度減弱。
② 裝片 將標(biāo)本片放置在工作臺的夾持器中,用夾持起移動標(biāo)本片至工作臺開口中心(透光孔處)。
③ 調(diào)節(jié)焦距 通過旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦手輪,將載物臺升到zui高限定位置(制片不能觸到物鏡),此時已準(zhǔn)備好調(diào)焦。使用4 倍或10 倍物鏡,在目視目鏡的同時,旋轉(zhuǎn)粗調(diào)手輪,使工作臺緩慢下降,在目視目鏡中觀察到的清晰的圖像時,再調(diào)節(jié)光闌聚光鏡孔,選擇與物鏡相匹配的孔,調(diào)節(jié)微調(diào)焦手輪,使視野中的圖像zui清晰。用低倍鏡找出標(biāo)本的范圍,然后提高鏡筒,在標(biāo)本的待檢部位加一小滴香柏油,慢慢將油鏡頭浸于油中,但勿接觸玻片。然后,自目鏡處一面觀察,一面微轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,使鏡筒徐徐上升,待看到模糊物象時,改用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)至物象清晰。如果是滴片標(biāo)本,先滴一滴標(biāo)本在玻片上,輕輕蓋上蓋玻片。加蓋玻片時,先將蓋玻片的一邊與在玻片上的水滴邊緣接觸,然后自一側(cè)輕輕放下,先在低倍鏡下觀察,然后在高倍鏡下觀察,通過改變光圈的大小或轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)焦手輪。
④ 還鏡 觀察完畢把鏡頭和載玻片上的油用3%擦凈。將低倍鏡轉(zhuǎn)成八字型.降下聚光器, 轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,使鏡臺下移,以免接物鏡與集光器相碰受損。罩上鏡套,放回原處。

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