更新時(shí)間:2016-06-14
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細(xì)胞培養(yǎng)過程中,PA317(逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞)從實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)到實(shí)驗(yàn)過程中的操作,都需要嚴(yán)格控制無菌。由于細(xì)胞對于生長的條件比較苛刻,所以無論從實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì),還是使用的物品及細(xì)胞培養(yǎng)的操作過程,都要注意保持無菌環(huán)境。
類型如下:
消化系統(tǒng)細(xì)胞株
呼吸系統(tǒng)細(xì)胞株
泌尿系統(tǒng)細(xì)胞株
血液循環(huán)系統(tǒng)
內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞株
神經(jīng)系統(tǒng)及其他細(xì)胞株
動物細(xì)胞株和菌株
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐。
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