CGM1人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)方法

CGM1人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)方法公司由多名留學(xué)歸國博士和生物科技領(lǐng)域精英聯(lián)合創(chuàng)建，坐落于美麗的大都市上海，公司堅守“以客戶為中心、以奮斗者為本"的原則，秉承“創(chuàng)新、共享"的發(fā)展理念，以達(dá)到客戶對“產(chǎn)品質(zhì)量的滿意，技術(shù)的滿意，售后服務(wù)的滿意 "為目標(biāo)，確保每一位用戶都能獲得更卓yue的體驗(yàn)。

我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

服務(wù)流程：

預(yù)約登記→辦理相關(guān)手續(xù)→復(fù)蘇細(xì)胞→細(xì)胞質(zhì)量檢查→發(fā)送細(xì)胞（或自己來取細(xì)胞）→細(xì)胞售后技術(shù)咨詢答疑。

養(yǎng)方法如下：

1、從手術(shù)室無菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后，仔細(xì)剝除腦膜、血管和纖維成分，置Hanks液中漂洗一、二次。

2、置于30—50倍體積的Hanks液中，此時腦組織比較柔軟，反復(fù)吹打即制成細(xì)胞懸液。

3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后，細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)快自然下沉，脂肪等雜物易漂浮，可吸除上層、反復(fù)二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細(xì)胞成分。

4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液，通過紗網(wǎng)成紗布過濾，計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞密度。

5、接入培養(yǎng)瓶或皿中，置5%CO2溫箱中培養(yǎng)。

無菌操作：

1. 用紫外燈照射臺子。

2. 用的器材*滅菌包裝好。

3. 在酒精燈附近操作（不能太靠近）。

4. 帶一次性無菌手套，避免袖子或手上的細(xì)菌掉入培養(yǎng)基或細(xì)胞內(nèi) 。

注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì)胞匯合度80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通交流，由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

購買注意細(xì)節(jié)：

1、先咨詢一下CGM1人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)方法，所買的細(xì)胞是用的什么培養(yǎng)基以及什么血清，先準(zhǔn)備好，也用同樣的培養(yǎng)基。

2、必要時索取所買細(xì)胞的一些技術(shù)資料。

3、要忘了問一些培養(yǎng)所買細(xì)胞的一些生長特性，細(xì)胞來源，細(xì)胞代數(shù)，細(xì)胞生長快慢大約多少天可以傳代等。